基因干擾慢病毒是一種特殊的病毒載體，用于實現(xiàn)基因干擾(RNA干擾，RNAi)技術(shù)。慢病毒：慢病毒是一種有包膜的RNA病毒，直徑為80~120nm，呈二十面體對稱結(jié)構(gòu)、球形。它屬于逆轉(zhuǎn)錄病毒的一種，但具有更廣的宿主范圍，對分裂細胞和非分裂細胞...

過表達慢病毒是一種基于慢病毒載體的基因傳遞系統(tǒng)。慢病毒是一類單鏈RNA病毒，其基因組可以整合到宿主細胞的染色體上，從而實現(xiàn)長期穩(wěn)定的基因表達。通過將目的基因克隆到慢病毒載體中，利用慢病毒的包裝質(zhì)粒和輔助質(zhì)粒共同轉(zhuǎn)染到包裝細胞中，經(jīng)過包裝、成...

慢病毒包裝試劑盒通常包含優(yōu)化的慢病毒包裝輔助質(zhì)粒混合物、表達特定標(biāo)記蛋白(如eGFP)的對照質(zhì)粒以及高效轉(zhuǎn)染試劑。這些組件共同協(xié)作，能夠表達出病毒包裝所需的各種必需成分，如gag基因(編碼病毒主要的結(jié)構(gòu)蛋白)、pol基因(編碼病毒特異性的酶...

蛋白轉(zhuǎn)染是一種將外源蛋白質(zhì)導(dǎo)入細胞的技術(shù)，廣泛應(yīng)用于生物學(xué)研究和基因治療領(lǐng)域。1.定義：將外源蛋白質(zhì)或其編碼的DNA序列導(dǎo)入到宿主細胞中，使該細胞能夠表達和產(chǎn)生相應(yīng)的蛋白質(zhì)。2.方法：常見的方法包括化學(xué)法、電穿孔法、脂質(zhì)體介導(dǎo)法和病毒載體法...

核酸轉(zhuǎn)染試劑通常包括載體、輔助劑和緩沖液等成分。其中，載體是用于將DNA或RNA包裹起來并保護其免受降解的物質(zhì)。輔助劑則可以幫助載體進入細胞內(nèi)部，并促進其與細胞膜的結(jié)合。緩沖液則用于調(diào)節(jié)pH值和離子濃度，以維持細胞的正常生理狀態(tài)。在進行核酸...

在現(xiàn)代生命科學(xué)領(lǐng)域中，基因干擾技術(shù)已經(jīng)成為了一種重要的分子生物學(xué)工具，它通過特定的方法抑制或調(diào)節(jié)基因的表達，為研究基因功能、治療疾病以及生物技術(shù)應(yīng)用提供了新的可能性。基因干擾的核心機制是RNA干擾(RNAi)。這種現(xiàn)象在植物和線蟲中發(fā)現(xiàn)，后...

基因過表達是現(xiàn)代分子生物學(xué)研究中的一項重要技術(shù)，它涉及將特定基因在目標(biāo)生物體內(nèi)高水平表達，以便研究該基因的功能和調(diào)控機制，或用于生產(chǎn)大量的蛋白質(zhì)等。基因過表達通常涉及以下幾個關(guān)鍵步驟：選擇目標(biāo)基因并復(fù)制其DNA序列；其次，將這段基因序列插入...

慢病毒包裝細胞系是一種理想的工具，可用于實現(xiàn)有效的基因傳遞和表達，具有廣泛的應(yīng)用前景。隨著慢病毒包裝技術(shù)的廣泛應(yīng)用，選擇適合自己研究需要的細胞系變得至關(guān)重要。是用于生產(chǎn)慢病毒載體的特殊細胞系。慢病毒是一類能夠穩(wěn)定整合到宿主基因組中的病毒，可...

慢病毒濃縮試劑的原理基于離心濃縮、凍融循環(huán)和沉淀洗滌的方法。首先，將含有慢病毒的培養(yǎng)液通過離心操作進行初步濃縮，去除大部分細胞殘渣和雜質(zhì)。接下來，將濃縮后的慢病毒溶液凍結(jié)，并迅速解凍，形成凍融循環(huán)。這個過程會導(dǎo)致慢病毒表面的脂質(zhì)包膜破裂，釋...

穩(wěn)定細胞株是指具有長時間傳代穩(wěn)定轉(zhuǎn)基因表達的細胞系，其原理主要包括兩個方面：轉(zhuǎn)染外源DNA和篩選穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞。穩(wěn)定細胞株的建立需要將外源DNA轉(zhuǎn)染到目標(biāo)細胞中。目前常用的轉(zhuǎn)染方法有瞬時轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染兩種。瞬時轉(zhuǎn)染主要通過電轉(zhuǎn)、化學(xué)轉(zhuǎn)染或病毒...